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什麼是預染蛋白Marker
瀏覽次數╃↟:98釋出日期╃↟:2023-01-05

預染蛋白marker是Western Blot實驗中常用的一種試劑✘•·,那麼預染蛋白marker到底是什麼•◕•?用的時候又有哪些注意事項呢•◕•?

預染蛋白marker其實就是一些純化好的蛋白混合物✘•·,透過與染料共價耦聯✘•·,在電泳過程中或者轉膜時可以直接觀察到·│₪☁•。預染蛋白marker的出現方便了我們的實驗✘•·,可以幫助我們在電泳時·✘▩、電泳後✘•·,以及轉膜後監測電泳情況和估計遷移率·│₪☁•。比如使用垂直電泳時*分辨區域大約在膠的2/3處✘•·,我們使用預染Marker就可以預測電泳的程序·│₪☁•。當目標蛋白進入*分辨區時就可以停止電泳✘•·,以期得到*分辨效果·│₪☁•。如果觀察到Marker電泳異常也可以及時終止電泳·│₪☁•。此外✘•·,還可以透過直接觀察預染marker的轉移效率來推斷目標蛋白的轉膜是否*·│₪☁•。

值得注意的是預染蛋白Marker的蛋白混合物是與染料進行共價耦聯的✘•·,所以在不同的電泳緩衝液中蛋白條帶的遷移特性可能會發生某些變化✘•·,因此可能導致一些偏差✘•·,因此同樣的條帶在不同的緩衝液中所參考的分子量大小也是具有差異的·│₪☁•。

那麼使用時我們應該注意哪些事情呢•◕•?

1. 及時更換電泳緩衝液並使用新配製的凝膠✘•·,以免影響電泳結果;

2. 開封后儘量避免反覆凍融;

3.為避免汙染✘•·,可根據需要分裝成小管✘•·,建議每管分裝10μl✘•·,-20℃貯存✘•·,每次取一管使用✘•·,隨用隨取·│₪☁•。


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